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2017年初級西藥師考試知識點:巨噬細胞

2017年初級西藥師考試知識點:巨噬細胞

導語:巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要物件。巨噬細胞容易獲得,便於培養,並可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養,難以長期生存。我們一起來看看相關的考試知識吧。

2017年初級西藥師考試知識點:巨噬細胞

單核細胞及由單核細胞演變而來的.具有吞噬功能的巨噬細胞,稱為單核吞噬細胞系統。單核細胞發生於骨髓的多能幹細胞,迴圈於血液中,穿透血管內皮進入組織內,轉變為巨噬細胞。單核吞噬細胞系統在體內分佈廣,細胞數量多,主要分佈於疏鬆結締組織、肝、脾、淋巴結、骨髓、腦、肺以及腹膜等處,並依其所在組織的不同而有不同的名稱。

單核吞噬細胞系統的細胞有很強的吞噬能力,能吞噬異物、細菌、衰老和突變的細胞等。此外,也吞噬抗原抗體複合物,並參與脂質與膽固醇代謝,可吞噬和蓄積脂質。吞噬的生理意義在於消除體內不需要的物質,其中巨噬細胞與淋巴細胞、粒細胞、肥大細胞,在功能上,有互相促進和互相抑制的作用。當單核吞噬細胞系的生理功能失調時,可引起多種疾病。

培養方法

巨噬細胞也建有無限細胞系,大多來自小鼠,如P338D1、S774A.1、RAW309Cr.l等,均獲惡性,培養中呈巨噬細胞形態和吞噬功能,易於傳代和瓶壁分離,但難以建株。培養巨噬細胞可用各樣方法和各種來源來獲取細胞,以小鼠腹腔取材法最為實用,其法如下:

1、實驗前三天,向每隻小鼠腹腔內注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml(勿注入腸內)。

2、引頸殺死動物,手提鼠尾將全鼠浸入70%酒精中3~5秒。

3、置動物於解剖臺上,用針頭固定四肢,雙手持鑷撕開面板拉向兩側,暴露出腹膜,但勿傷及腹膜壁。

4、再用70%酒精擦洗腹膜壁後,用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中,同時從兩側用手指揉壓腹膜壁,令液體在腹腔內充分流動。

5、用針頭輕輕挑起腹壁,使動物體微傾向一側,使腹腔中液體集於針頭下吸取入針管內。

6、小心拔出針頭,把液體注入離心管中,250g4℃離心10分鐘,去上清,加10mlEagle培養基。

7、計數細胞,每隻小鼠可產生20~30×105細胞,其中90%為巨噬細胞。

8、為獲取3×105帖附細胞/平方釐米,需接種2.5×106/ml。

9、為純化培養細胞,去除其它白細胞,接種數小時後,去除培養液,用Eagle液沖洗1~2次後,再加新Eagle培養液置37℃,5%CO2溫箱中培養。

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